關(guān)于血清的一些問題

血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。因此，我們特別整理了一些實(shí)驗(yàn)室里常會(huì)遇到的問題，供大家參考：
   1． 存放血清的方法？
   我們建議血清應(yīng)保存在－20℃以下。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)半個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

   2． 如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損？
   我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

   3． 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？
   血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍地原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖素蛋白（形成凝血地蛋白之一）在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
   若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議你以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

   4．為什么要熱滅活血清？
   加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。

   5．有必要做熱滅活嗎？
   實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的 。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓幕钚?，而造成?xì)胞生長(zhǎng)速度的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的 血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)"，常常會(huì)讓研究者誤以為是微生物的分裂擴(kuò)增。
   因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此以來(lái)，不但節(jié)省你寶貴的時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量。

   6．如何避免沉淀物的生產(chǎn)？
   我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作：
   ⑴.解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法（－20℃至4℃至室溫），若血清解凍時(shí)改變的溫度太大（如－20℃至37℃），實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
   ⑵.解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
   ⑶.請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
   ⑷.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
   ⑸.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多