非限制性體干細胞的分離點擊次數(shù)：1854 更新時間：2011-01-04

非限制性體干細胞的分離

非限制性體干細胞（USSCs）的分離

試劑和材料：
1. 起始培養(yǎng)基；
2. 擴增培養(yǎng)基；
3. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA；
4. PBSA；
5. T25培養(yǎng)瓶；

實驗方法：
1. 制備和分離臍帶血來源的MNCs（CB-MNCs）；
2. 如果使用凍存的CB-MNCs，復(fù)蘇的細胞可以用于培養(yǎng)，不需要其他分離步驟；
3. 用起始培養(yǎng)基按5×10⁶—7×10⁶個細胞/ml濃度接種到T25的培養(yǎng)瓶中；
4. 將細胞放在37℃，5%CO^₂的條件下培養(yǎng)，2-4周內(nèi)每周一次更換培養(yǎng)基和細胞因子；
5. 形成USSC集落后，在擴增培養(yǎng)基中擴增細胞；
6. 將細胞放在37℃，5%CO^₂的條件下培養(yǎng)；
7. 到達80%匯合后，用0.05%胰蛋白酶/EDTA消化細胞，并按1：3比例傳代，在相同培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)；

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產(chǎn)品分類

國產(chǎn)
羅氏試劑: 凋亡試劑盒; Proteinase K
millipore: 抗體
進口試劑: Hybridization Bags; Blocking Reagent; Nylon Membranes; 其他品牌; 其他試劑; sigma試劑; 羅氏roche試劑; GE（安瑪西亞）; Elisa試劑盒
細胞因子: PeproTech
流式抗體: Biolegend流式抗體; eBioscience; BENDER; PeproTech; BD流式抗體; Invitrogen
Thermo品牌: Invitrogen品牌; THERMO耗材; pierce試劑
R＆D試劑: 蛋白酶K
abcam抗體
工業(yè)原料: 羅氏工業(yè)原料
生化試劑: Coring; 胎牛血清; 蛋白酶抑制劑; Amresco; BD試劑; usb
CST抗體
移液器: 百得Biohit; 普蘭德Brand
ELISA 試劑盒: 人ELISA試劑盒; 大鼠ELISA試劑盒; 小鼠ELISA試劑盒; 兔子ELISA試劑盒; 雞ELISA試劑盒; 豬ELISA試劑盒; 豚鼠ELISA試劑盒; 其它ELISA試劑盒; 植物ELISA試劑盒
實驗室耗材: corning; BD Falcon現(xiàn)貨; Millipore
IKA實驗通用儀器: 磁力攪拌器
NuSep: 試劑
OMEGA試劑

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